细胞培养技术是一种体外增殖细胞的常规实验技术,目前被大范围的使用在教学、科研和临床实验。污染控制是细胞培养能不能成功的关键。引起培养细胞污染的微生物有细菌、霉菌、黑胶虫、支原体等,其中支原体是常见的污染物.
支原体属于缺乏细胞壁的原核微生物,直径约 0.13 ~ 0.18 μm,大小介于细菌和病毒之间,可透过一般滤膜( 0.22 μm) ,因此在细胞培养过程中,细胞极易受到支原体污染。已有许多调查及研究显示,全球范围内正在使用的细胞体系中支原体污染发生率达到 30% ~ 60%。
支原体污染对细胞的影响有哪些?1、影响细胞的生长状态及形态支原体可使培液中支持细胞生长的营养的东西含量减少,造成细胞生长缓慢甚至停止;另外还会导致细胞微管解聚,引起细胞一系列病变,表现为细胞收缩、贴壁细胞脱落、裂解等。
2、影响细胞的代谢和功能支原体污染对细胞代谢及功能的影响主要体现在以下几个方面:
(1)培液中的精氨酸被支原体大量消耗,引起细胞蛋白质、DNA、rRNA、mRNA 的合成障碍;
(2)支原体活动使培液成分发生改变(如发酵型支原体降解糖类产生酸性物质),影响细胞代谢。
此外,支原体污染还会影响一些病毒在细胞中的产量、使恶性细胞致癌能力变弱、影响淋巴细胞分化等。
细胞发生支原体污染,若经过大剂量抗生素处理,对细胞损伤较大,使细胞原有的许多生物学特性,如基因表达、抗原性和代谢特点发生相应的改变,对后续教学实验和科研结果造成严重影响。细胞培养工作中预防支原体污染尤为重要。
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